原代細(xì)胞與免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染為什么這么難？一種更穩(wěn)定的電轉(zhuǎn)染解決方案

在基因編輯、細(xì)胞治療和免疫研究中，高效、低損傷的細(xì)胞轉(zhuǎn)染始終是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵步驟之一。然而，許多實(shí)驗(yàn)人員都有相同的困擾：

脂質(zhì)體在常規(guī)細(xì)胞系中效果尚可，但一遇到原代細(xì)胞、干細(xì)胞或免疫細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞存活率往往難以兼顧。

針對這一難題，基于微量電轉(zhuǎn)染（Microporation）技術(shù)的 ExTransfection™ 電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，正在成為越來越多實(shí)驗(yàn)室的選擇。

一、為什么傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方法在原代細(xì)胞中頻頻失效？

1?? 脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的天然局限

脂質(zhì)體依賴細(xì)胞的內(nèi)吞機(jī)制，而原代細(xì)胞、T 細(xì)胞、iPSC 等往往：

• 內(nèi)吞效率低

• 對外源復(fù)合物敏感

• 易出現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)

最終結(jié)果是：
?? 轉(zhuǎn)染效率低 + 細(xì)胞死亡率高

2?? 傳統(tǒng)電轉(zhuǎn)染的“副作用"問題

雖然電轉(zhuǎn)染可繞過內(nèi)吞過程，但傳統(tǒng)比色皿式電轉(zhuǎn)染：

• 電場分布不均

• 樣品體積大

• 電擊與熱效應(yīng)明顯

容易導(dǎo)致細(xì)胞不可逆損傷，尤其不適合珍貴樣本。

二、ExTransfection™：基于微量電轉(zhuǎn)染的解決方案

ExTransfection™ 是由 NanoEnTek 推出的新一代臺式電轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，其核心理念是：

在盡可能小的體積內(nèi)，構(gòu)建均勻、可控的電場環(huán)境。

?? 核心技術(shù)特點(diǎn)

• 移液槍式一次性電轉(zhuǎn)染槍頭

• 10 µL / 100 µL 兩種規(guī)格

• 內(nèi)置金電極，電場穩(wěn)定

• 避免交叉污染

• 微腔體電轉(zhuǎn)染結(jié)構(gòu)

• 電場均勻

• 熱效應(yīng)小

• 明顯提升細(xì)胞存活率

• 精準(zhǔn)脈沖參數(shù)控制

• 電壓、脈沖寬度、次數(shù)可調(diào)

• 適配不同細(xì)胞類型和遞送分子

三、在“難轉(zhuǎn)染細(xì)胞"中的應(yīng)用優(yōu)勢

ExTransfection™ 特別適用于以下場景：

• 原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染

• T / B / NK 免疫細(xì)胞

• 干細(xì)胞（ESC / iPSC）

• CRISPR/Cas9 RNP 遞送

在這些應(yīng)用中，其優(yōu)勢主要體現(xiàn)在：

• ? 轉(zhuǎn)染效率更穩(wěn)定

• ? 細(xì)胞存活率顯著提升

• ? 對細(xì)胞狀態(tài)依賴性更低

四、支持多種分子遞送形式

ExTransfection™ 可用于導(dǎo)入多種生物分子，包括但不限于：

• 質(zhì)粒 DNA

• mRNA / siRNA

• 功能蛋白

• CRISPR/Cas9 RNP 復(fù)合物

尤其在 CRISPR 應(yīng)用中，直接遞送 RNP 復(fù)合物有助于：

• 縮短作用時(shí)間

• 降低脫靶風(fēng)險(xiǎn)

五、內(nèi)置程序庫，降低使用門檻

系統(tǒng)內(nèi)置大量細(xì)胞類型的推薦程序參數(shù)，用戶可：

• 直接調(diào)用預(yù)設(shè)方案

• 在此基礎(chǔ)上進(jìn)行小幅參數(shù)微調(diào)

這使得 ExTransfection™ 即使在接觸第一次電轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)室中，也能快速獲得可用結(jié)果。

六、與常見轉(zhuǎn)染方式的對比

七、總結(jié)

隨著基因編輯和細(xì)胞治療研究的不斷深入，轉(zhuǎn)染工具本身正在成為限制實(shí)驗(yàn)效率的重要因素之一。
ExTransfection™ 通過微量電轉(zhuǎn)染技術(shù)，在效率、存活率和重復(fù)性之間取得了更好的平衡，為原代細(xì)胞和難轉(zhuǎn)染細(xì)胞提供了一種更穩(wěn)定、更可控的解決方案。