為什么高通量實驗更容易失?。棵芊獠牧贤粐乐氐凸?/a>

在高通量實驗、并行反應和條件篩選中，研究人員通常會重點關注反應體系本身，例如溶劑、試劑比例或反應條件設置，而對反應體系的密封方式關注不足。事實上，在多孔板實驗中，密封材料往往直接影響實驗的重復性和數據可靠性。尤其是在使用有機溶劑、易揮發試劑或進行長時間反應時，密封不當極易引發一系列問題。高通量實驗中，密封環節常見的三大問題1.溶劑揮發導致條件漂移在圓孔（RoundWell）多孔板中，如果封膜對溶劑阻隔能力不足，不同孔位的溶劑揮發速率會產生差異，直接影響反應濃度和反應速率。2....

查看更多

CRISPR/Cas9 原代細胞轉染，為什么越來越多實驗室選擇電轉染？

CRISPR/Cas9技術的成熟，使基因編輯逐漸從模式細胞系走向原代細胞和臨床相關細胞模型。然而，在實際操作中，許多實驗人員很快會遇到一個現實問題：CRISPR體系本身并不難，難的是如何把它高效、溫和地送進原代細胞。在這一背景下，電轉染逐漸成為原代細胞CRISPR實驗中的主流選擇之一。一、CRISPR/Cas9在原代細胞中的遞送難點與常規細胞系相比，原代細胞在進行CRISPR編輯時往往面臨多重挑戰：對外界刺激高度敏感轉染后細胞存活率要求高編輯效率需要穩定、可重復遞送時間過長可...

查看更多

OD600 到底能不能用超微量分光光度計來測？

在細菌培養、蛋白表達和生長狀態判斷中，OD600是實驗室常用、也是最容易被“想當然”的指標之一。一個被頻繁問到的問題是：OD600能不能用超微量分光光度計來測？會不會不準？答案并不是簡單的“能”或“不能”，而是：取決于你“為什么測OD600”，以及“你需要它來做什么判斷”。一、先說結論?可以用超微量分光光度計測OD600?但并不是所有OD600場景都適合如果不區分使用場景，就容易出現兩種認知：一種覺得“超微量測OD600都不靠譜”另一種覺得“只要能出數就行”這兩種看法都不完整...

查看更多

原代細胞轉染效率低？實驗中常被忽視的幾個關鍵原因

在基因編輯、細胞功能研究和轉化醫學實驗中，原代細胞轉染始終是一個繞不開的技術難點。不少實驗人員都有類似經歷：在常規細胞系中效果良好的轉染方案，一旦應用到原代細胞中，轉染效率明顯下降，甚至伴隨嚴重的細胞死亡。那么，原代細胞轉染失敗的原因究竟在哪里？一、原代細胞與常規細胞系的本質差異與HEK293、HeLa等永生化細胞系相比，原代細胞通常具有以下特點：內吞活性較低對外界刺激高度敏感對培養條件依賴性強修復能力有限這意味著：??原代細胞并不“適合”依賴內吞機制的轉染方式。二、脂質體轉...

查看更多

原代細胞與免疫細胞轉染為什么這么難？一種更穩定的電轉染解決方案

在基因編輯、細胞治療和免疫研究中，高效、低損傷的細胞轉染始終是實驗成功的關鍵步驟之一。然而，許多實驗人員都有相同的困擾：脂質體在常規細胞系中效果尚可，但一遇到原代細胞、干細胞或免疫細胞，轉染效率和細胞存活率往往難以兼顧。針對這一難題，基于微量電轉染（Microporation）技術的ExTransfection™電轉染系統，正在成為越來越多實驗室的選擇。一、為什么傳統轉染方法在原代細胞中頻頻失效？1??脂質體轉染的天然局限脂質體依賴細胞的內吞機制，而原代細胞、T細...

查看更多